最初,尿沉渣成分染色是将墨汁混入沉渣成分使之染色,现在则是使用单克隆抗体,对特定成分作特异性染色。
染色的目的:在于尽可能清晰鉴别沉渣成分。
染色法按目的不同可分为:
⑴尿沉渣成分全体染色的方法
⑵对特定成分染色的方法。
一、Sternheimer染色(S染色)1、染色的目的
⑴这是将尿沉渣成分全体染色的方法,在日常检查中应用最为广泛。
⑵将上皮细胞的核和细胞质染色区分,特别有助于异型细胞的鉴别。
⑶另外,管型和其他成分也能清晰地被染色。
2、染色液的调制
⑴将Ⅰ液和Ⅱ液滤过后,按2:1的比例混合。
⑵将混合液置于褐色瓶中,在室温下可稳定保存数月。
⑶Ⅰ液
2%阿利新蓝8GS水溶液
⑷Ⅱ液
1.5%派洛宁B水溶液
3、染色方法在0.2mL的尿沉渣中滴入1滴染色液
4、染色性
⑴上皮细胞的细胞质、核仁被染成粉红色~紫红色。
⑵核被染成蓝色~紫色。
二、Sternheimer-Malbin染色(SM染色)1、染色的目的
⑴该染色法本来的目的是根据染色性将白细胞区分为浓染细胞、淡染细胞,闪光细胞,以辅助诊断尿路感染。
⑵但目前其临床意义也未明确。
⑶因为白细胞以外的成分也被染色,所以作为尿沉渣成分全体染色的方法使用。
2、染色液的调制
⑴将Ⅰ液和Ⅱ液滤过后,按3:97的比例混合。
⑵如果发生沉淀,要重新滤过或重新调制。
⑶Ⅰ液
龙胆紫…………3.0g
95%乙醇.……..20mL
草酸铵………….0.8g
蒸馏水.………….80mL
⑷Ⅱ液
番红O……………0.25g
95%乙醇...........10mL
蒸馏水...............ml
3.染色方法
在0.2mL的尿沉渣中滴入1滴染色液。
4.染色性
⑴上皮细胞的细胞质被染成淡紫色。
⑵核被染成紫色~深褐色。
三、SudanⅢ染色1、染色的目的
⑴将尿中脂肪成分染色。
⑵尿沉渣中含有脂肪的成分有脂肪球、脂肪管型、卵圆形脂肪体、巨噬细胞等。
2、染色液的调制
⑴将SudanⅢ溶解于70%乙醇中,密封,在56~60℃的恒温箱中放置12小时。
⑵然后恢复至室温,过滤保存。
⑶染色液
70%乙醇.……………mL
SudanⅢ..............1~2g
3、染色方法
在0.2mL的尿沉渣中滴入2~3滴染色液。
4、染色性
脂肪球、脂肪管型、卵圆形脂肪体、巨噬细胞(含有脂肪)的脂肪成分被染成橙色~红色。
四、Prescott-rdie染色(PB染色)1、染色的目的
⑴将尿中白细胞(中性粒细胞)染色。
⑵尿中白细胞的判定有助于肾孟肾炎和膀胱炎等肾脏和泌尿系统炎症的诊断和治疗。
⑶另外,尿中可见变性的白细胞大小的小型细胞等,因此鉴别这些细胞时可使用该染色法。
⑷另外,该染色法还可有效鉴别上皮细胞管型和白细胞管型,以及尿流改道术(回肠通道术等)后患者尿中的回肠上皮细胞(肠粘膜上皮细胞)和白细胞。
2、染色液的调制
⑴将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ液混合,放置48小时后过滤使用。
⑵该染色液置于褐色瓶中可稳定保存数月。
⑶但因为会有结晶析出,所以有时需要过滤。
⑷Ⅰ液
2,7-二氨基芴........mg
焰红B..………………...mg
95%醇.......................70mL
⑸Ⅱ液
醋酸钠.......................11g
0.5%醋酸..................20mL
⑹Ⅲ液
3%过氧化氢..............1mL
3、染色方法
⑴在0.2mL的尿沉渣中滴入2~5滴染色液。
⑵但白细胞量多时,若不多添加染色液,有时不能被染色。
4、染色性
⑴中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞等含有过氧化物酶的白细胞被染成紫色~黑色。
⑵淋巴细胞以及其他细胞被染成红色。
五、Berlinblue染色1、染色的目的
⑴将尿中的含铁血黄素颗粒染色。
⑵含铁血黄素是生物体内的一种色素颗粒,是含有来源于血红蛋白的铁的黄褐色颗粒。
⑶含铁血黄素颗粒常见于发作性夜间血红蛋白尿、急性溶血性贫血、行军性血红蛋白尿、血型不合输血、大量输血后等引起血管内溶血的病态。
2、染色液的调制
⑴使用时将Ⅰ液和Ⅱ液等量混合。
⑵Ⅰ液
亚铁氰化钾……………2g
蒸馏水.....................mL
⑶Ⅱ液
盐酸………................1mL
蒸馏水.....................mL
3、染色方法
⑴在0.2mL尿沉渣中加入染色液10mL。
⑵放置10分钟以上,离心后对沉渣成分进行镜检。
4、染色性
含铁血黄素颗粒被染成蓝色。
六、Hansel染色1、染色的目的
⑴将尿中嗜酸性粒细胞的颗粒染色。
⑵尿中的白细胞大部分是中性粒细胞,有时也可见淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞等。
⑶尿中白细胞的分类有助于病态分析,特别是嗜酸性粒细胞的出现可有助于间质性肾炎、间质性膀胱炎、过敏性膀胱炎(某种药物所致)的诊断。
⑷Hansel染色对于鉴别尿中嗜酸性粒细胞是有效的染色法。
2、染色液的调制⑴染色液
亚甲基蓝………0.6g
伊红Y...............0.2g
甲醇..................60mL
⑵缓冲液
10%乙醇加磷酸缓冲液
3、染色方法
⑴在0.2mL尿沉渣中滴入2滴染色液,放置5分钟。
⑵然后加入10mL的10%乙醇加磷酸缓冲液进行混合。
⑶以g离心力进行离心5分钟,镜检沉渣。
4、染色性
⑴嗜酸性粒细胞的颗粒被染成橙红色,细胞质被染成无色~淡蓝色。
⑵中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞被染成无色~淡蓝色。
七、Lugol染色1、染色的目的
对尿沉渣中的含有糖原的细胞(中层~底层扁平上皮细胞)和淀粉粒进行染色。
2、染色液的调制
染色液:
碘........................1g
碘化钾……….......2g
蒸馏水……………mL
3、染色方法
在0.2mL的尿沉渣中滴入1滴染色液。
4、染色性
含有糖原的细胞被染成褐色,淀粉粒被染成紫色~黑色。
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